血液中酒精含量的分析——气相色谱法

   

    近年来酒驾、醉驾造成的交通事故不断增加，后果严重。快速准确分析出司机血液酒精的含量，是极为重要的任务。本方法依据标准GA/T 842-2019《血液酒精含量的检验方法》，采用单全自动顶空进样，双毛细柱双检测器对同一样品进行同时分析，仪器配置合理，操作简单，适合各级公安部门，医院司法鉴定中心配备。

1、 方法原理

    本方法利用酒精(以下称乙醇)的易挥发性，以叔丁醇为内标，用顶空气相色谱火焰离子化检测器进行检测；经与平行操作的乙醇标准品比较，以保留时间或相对保留时间定性，用内标法以乙醇对内标物的峰面积比进行定量分析。

2、 主要仪器配置

1）GC128气相色谱仪，EPC/EFC（电子压力/流量控制），双FID检测器；

2）全自动顶空进样器；

3）DB-ALC1色谱柱：30m×0.32mm×1.8μm；

4）DB-ALC2色谱柱：30m×0.32mm×1.2μm；

4）SF3000色谱工作站软件;

5）乙醇标准工作溶液：5、20、40、80、100、200mg/100mL；

6）叔丁醇内标工作溶液：4mg/100mL。

3、 实验方法

3.1样品处理方法

取0.10mL待测全血及0.50mL叔丁醇内标工作液加入样品瓶内，盖上硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀，待测。

3.2标准曲线绘制

配置系列浓度的乙醇标准工作溶液。

取系列浓度的各标准工作溶液0.10 mL及叔丁醇内标工作溶液0.50 mL，分别加入样品瓶内，制备校准曲线的乙醇标准工作溶液系列浓度为5、20、40、80、100、200 mg/100mL。

3.3实验条件

柱箱：恒温50℃；进样器：250℃；FID：250℃；

柱前压：0.04MPa；顶空温度：65℃；顶空时间：10min。

4.1 标准工作液色谱图

4.1.1  5mg/100mL 乙醇标准工作液色谱图

图2. DB-ALC2色谱柱5mg/100mL标准工作液色谱图

4.1.2  20mg/100mL 乙醇标准工作液色谱图

图3. DB-ALC1色谱柱20mg/100mL标准工作液色谱图

图4. DB-ALC2色谱柱20mg/100mL标准工作液色谱图

4.1.3  80mg/100mL 乙醇标准工作液色谱图

图5. DB-ALC1色谱柱80mg/100mL标准工作液色谱图

图6. DB-ALC2色谱柱80mg/100mL标准工作液色谱图

4.2 校准曲线

4.2.1 DB-ALC1色谱柱乙醇校准曲线为：y=-0.0245+0.0121*X，线性相关系数r=0.9995

 

4.2.2 DB-ALC2色谱柱乙醇校准曲线为：

y=-0.00227+0.0122*X，线性相关系数r=0.9996

4.3 定量及相对偏差计算

4.3.1 定量结果计算：

根据案件样品中乙醇及内标叔丁醇峰面积值，按照式（1）计算案件样品中的乙醇含量X。                

式中：X——案件样品中的乙醇含量，单位为毫克每100毫升（mg/100 mL）；Y——案件样品中乙醇及内标叔丁醇的峰面积比；a——线性方程的截距；b——线性方程的斜率。

 

4.3.2 计算定量结果相对偏差

平行操作的两份案件样品乙醇含量的相对相差按式（2）计算：

式中：

RD ——相对相差；

X₁、X₂——两份案件样品平行定量测定的乙醇含量数值；

X——两份案件样品平行测定乙醇含量的平均值。

 

4.4 空白样品加标重复性考察

空白样品加标量为80mg/100mL，考察其分析结果重复性，结果见下表：

表1. 80mg/100mL空白加标样品重复性测试结果

两个通道空白加标测试结果的相对标准偏差分别为：1.01%、0.96%。